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丙肝的實(shí)驗(yàn)室檢查方法

2017-03-31 13:58:31      

丙肝是一種較強(qiáng)的傳染病,主要經(jīng)輸血,針刺,吸毒等傳播。發(fā)病率較高,據(jù)統(tǒng)計(jì),全球丙肝的的感染率約為3%。那么,如何確診是否患了丙肝呢?下面是主要介紹丙肝診斷的實(shí)驗(yàn)室檢測方法。

(一)抗HCV抗體檢測

抗HCV抗體不是中和抗體,對人體無保護(hù)作用,但是目前診斷HCV的主要指標(biāo)。ELISA法是檢測抗HCV的最常用方法。目前第三代試劑的敏感度和特異度都有很大提高。該試劑使用的HCV抗原純度高,并采用了多種肽段搭配包被檢測板,其靈敏度和特異性均有了明顯提高,同時(shí)縮短了檢出時(shí)間。但因感染HCV后,抗HCV出現(xiàn)較慢,在“窗口期”內(nèi)可發(fā)生抗HCV假陰性,故早期診斷丙型肝炎仍有困難。

(二)HCVRNA檢測

HCVRNA可以在暴露后1~2周被檢出,是早期診斷的敏感指標(biāo)。

1、HCVRNA定性檢測:對抗HCV陽性HCV持續(xù)感染者,需要通過HCVRNA定性試驗(yàn)確證感染。HCVRNA定性檢測的特異度在98%以上,只要一次病毒定性檢測為陽性,即可確證HCV感染。1次檢測陰性并不能完全排除HCV感染,應(yīng)重復(fù)檢測。目前,大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室采用逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)法可檢測到100拷貝/毫升以下。但缺乏標(biāo)準(zhǔn)化,有許多因素,如標(biāo)本的處理及儲(chǔ)藏方式、引物設(shè)計(jì)、擴(kuò)增倍數(shù)、反應(yīng)條件、DNA產(chǎn)物污染、擴(kuò)增后產(chǎn)物檢測系統(tǒng)等可影響PCR結(jié)果;

2、HCVRNA定量檢測:定量PCR(qPCR)(PCR【譯】PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段??煽醋魃矬w外的特殊DNA復(fù)制)、分支DNA(bDNA)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR法均可用于檢測HCVRNA病毒載量。不同HCVRNA定量檢測法可用拷貝/毫升和IU/ml兩種表示方法。HCV載量的高低與疾病的嚴(yán)重程度和疾病的進(jìn)展并無絕對相關(guān),但可作為抗病毒療效評估的觀察指標(biāo)。在HCVRNA檢測中,應(yīng)注意可能存在的假陽性和假陰性結(jié)果。HCVRNA檢測技術(shù)操作繁瑣,對環(huán)境和控制條件要求較高,不易被基層醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室采用和推廣。

(三)HCV核心抗原檢測

HCV核心抗原作為HCV感

染者體內(nèi)出現(xiàn)的早期感染標(biāo)志,只比HCVRNA晚約1天能夠檢出。HCV抗原檢測耗時(shí)短,方法與常規(guī)酶聯(lián)免疫法相似,不用添加儀器設(shè)備,大大縮短了窗口期。但是,當(dāng)機(jī)體出體內(nèi)HCV核心抗原和抗體相結(jié)合,使抗原現(xiàn)抗HCV之后,

檢出率降低或不能檢出。因此,HCV核心抗原可應(yīng)用于HCV感染的早期診斷。對無償獻(xiàn)血者進(jìn)行HCV核心抗原和抗HCV聯(lián)合檢測,可進(jìn)一步縮短窗口期,加強(qiáng)輸血安全。

(責(zé)任編輯:陳曉 )

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