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DNA探針廣泛應(yīng)用探測巨細(xì)胞病毒

2013-11-23 00:39:24      家庭醫(yī)生在線

巨細(xì)胞病毒(Human cytomegalovirus, HCMV) 也稱人皰疹病毒5型,屬皰疹病毒β亞科,為線狀雙鏈DNA病毒。我國為HCMV感染高發(fā)地區(qū),多于兒童時期獲得。單靠臨床表現(xiàn)不能診斷CMV感染,從臨床標(biāo)本中分離出病毒,同時抗體呈出4倍以上增加或持續(xù)抗體滴度升高,將有助于診斷。

一、病毒分離

最好用唾液、尿液、生殖道分泌物、乳汁和白細(xì)胞,接種到人的成纖維細(xì)胞內(nèi)繁殖和分離,細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)在1天或數(shù)周后出現(xiàn),經(jīng)固定和HE染色后可觀察到巨細(xì)胞,核內(nèi)有內(nèi)包涵體,核周暈圈及嗜酸性胞漿內(nèi)包涵體,很象“貓頭鷹眼”(owl′s eye)亦可用單克隆或多克隆抗體的熒光染色等方法檢查。

二、血清抗體檢測

最常用的有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CF)、間接免疫熒光試驗(yàn)(IIF)、免疫酶試驗(yàn)(EIA)、間接血凝試驗(yàn)(IHA)和放射免疫試驗(yàn)(RIA)等檢測CMV-IgG和IgM抗體。當(dāng)單份血清標(biāo)本已確定既往有CMV感染時,應(yīng)當(dāng)立即留血清標(biāo)本,以及間隔2周、4周、8周再留血清標(biāo)本,結(jié)合病毒分離可作原發(fā)感染診斷。

三、DNA探針

已廣泛應(yīng)用于檢測CMV,其中以32P標(biāo)記的探針敏感性最高,對某些標(biāo)本來說,雜交方法可能比病毒分離更敏感。

四、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)

(責(zé)任編輯:吳敏 )

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