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生物素容易與蛋白質(zhì)和核酸類等生物大分子結(jié)合，形成的生物素衍生物，不僅保持了大分子物質(zhì)的原有生物活性，而且比恬度高，具多價(jià)性。此外，每個(gè)親和素分子有四個(gè)生物素結(jié)合部位，可同時(shí)以多價(jià)形式結(jié)合生物素化的大分子衍生物和標(biāo)記物。因此，生物素－親合素系統(tǒng)具有多級(jí)放大作用，使其在應(yīng)用時(shí)可極大地提高檢測(cè)方法的靈敏度。

生物素－親合素系統(tǒng)原理：生物素－親合素系統(tǒng)是在常規(guī)ELISA原理的基礎(chǔ)上，結(jié)合生物素與親和素間的高度放大作用，而建立的一種檢測(cè)系統(tǒng)。親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白，分子量為68kDa，由4個(gè)亞單位組成，對(duì)生物有非常高的親和力(結(jié)合常數(shù)高達(dá)1015M-1)。生物素很易與蛋白質(zhì)(如抗體等)以共價(jià)鍵結(jié)合。這樣，結(jié)合了酶的親和素分子與結(jié)合有特異性抗體的生物素分子產(chǎn)生反應(yīng)，既起到了多級(jí)放大作用，又由于酶在遇到相應(yīng)底物時(shí)的催化作用而呈色，達(dá)到檢測(cè)未知抗原(或抗體)分子的目的。

親和素是一種糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，由于每個(gè)分子由4個(gè)亞基組成，因此可以和4個(gè)生物素分子親密結(jié)合。生物素在人體內(nèi)是不能單獨(dú)起作用的，它需要與其他酶、氨基酸脂肪衍生物等結(jié)合來(lái)綜合調(diào)控。生物素結(jié)合常數(shù)即表示了它與其他有機(jī)分子結(jié)合能力的大小。

生物素化的抗體，是在抗體上連接生物素，生物素能和親和素特異性高親和性結(jié)合，親和力是抗原抗體結(jié)合的一萬(wàn)倍，這樣又起到級(jí)聯(lián)放大的作用。所以能更加靈敏的顯示微量抗原。這種方法也叫親和免疫組化。

生物素親和素系統(tǒng)的特點(diǎn)主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。1.靈敏度：生物素容易與蛋白質(zhì)和核酸類等生物大分子結(jié)合，形成的生物素衍生物，不僅保持了大分子物質(zhì)的原有生物活性，而且比恬度高，具多價(jià)性。此外，每個(gè)親和素分子有四個(gè)生物素結(jié)合部位，可同時(shí)以多價(jià)形式結(jié)合生物素化的大分子衍生物和標(biāo)記物。因此，生物素－親合素系統(tǒng)具有多級(jí)放大作用，使其在應(yīng)用時(shí)可極大地提高檢測(cè)方法的靈敏度。2.特異性：親和素與生物素間的結(jié)合具有極高的親和力，其反應(yīng)呈高度專一性。因此，BAS的多層次放大作用在提高靈敏度的同時(shí)，并不增加非特異性干擾。而且，BAS結(jié)合特性不會(huì)因反應(yīng)試劑的高度稀釋而受影響，使其在實(shí)際應(yīng)用中可最大限度地降低反應(yīng)試劑的非特異作用。3.穩(wěn)定性：親和素結(jié)合生物素的親和常數(shù)可為抗原-抗體反應(yīng)的百萬(wàn)倍，二者結(jié)合形成復(fù)合物的解離常數(shù)很小，呈不可逆反應(yīng)性；而且酸、堿、變性劑、蛋白溶解酶以及有機(jī)溶劑均不影響其結(jié)合。因此，BAS在實(shí)際應(yīng)用中，產(chǎn)物的穩(wěn)定性高，從而可降低操作誤差，提高測(cè)定的精確度。4.適用性：生物素和親和素均可制成多種衍生物，不僅可與酶、熒光素和放射性核素等各類標(biāo)記技術(shù)結(jié)合，用于檢測(cè)體液、組織或細(xì)胞中的抗原-抗體、激素—受體和核酸系統(tǒng)以及其他多種生物學(xué)反應(yīng)體系，而且也可制成親和介質(zhì)，用于分離提純上述各反應(yīng)體系中的反應(yīng)物。此外，多種BAS的商品化試劑，為臨床檢測(cè)和科研工作提供了有利條件。5.其他：生物素－親合素系統(tǒng)可依據(jù)具體實(shí)驗(yàn)方法要求制成多種通用性試劑（如生物素化第二抗體等）適用于不同的反應(yīng)體系，而且都可高度稀釋，用量很少，實(shí)驗(yàn)成本低；尤其是生物素－親合素系統(tǒng)與成本高昂的抗原特異性第一抗體偶聯(lián)使用，可使后者的用量大幅度減少，節(jié)約實(shí)驗(yàn)費(fèi)用．此外，由于生物素與親和素的結(jié)合具高速、高效的特性，盡管生物素－親合素系統(tǒng)的反應(yīng)層次較多，但所需的溫育時(shí)間不長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)往往只需數(shù)小時(shí)即可完成